Qu'est-ce que l'antibiogramme?
L'antibiogramme est un test microbiologique utilisé pour tester la sensibilité d'un microorganisme à un ou plusieurs médicaments antimicrobiens.
Principalement utilisé au niveau de la santé, l'antibiogramme est traditionnellement réalisé sur des échantillons de colonies bactériennes dérivées d'unités prélevées par écouvillonnage pharyngé, urétral, rectal ou vaginal, ou isolés à partir d'échantillons de selles, d'urine ou de crachats.
Techniques exécutives et résistance aux antibiotiques
L’antibiogramme est souvent réalisé avec la méthode de diffusion à la gélose, également appelée technique de Kirby-Bauer.
Au cours de la procédure, un échantillon bactérien est prélevé dans les colonies et ensemencé (correctement éliminé) sur le sol approprié, dans lequel sont également distribués des disques imbibés d'antibiotiques à des concentrations connues (dictées par les besoins thérapeutiques). La plaque est ensuite placée dans un incubateur et après une période de temps prédéterminée (par exemple, 18 heures à 35 ° C), une croissance microbienne relativement uniforme peut être appréciée, avec des halos plus ou moins grands autour des disques en papier Bibula. En fonction de l'étendue de ces zones d'inhibition, la sensibilité de la bactérie est évaluée pour chaque antibiotique testé: si le diamètre est grand, le microorganisme est sensible au médicament (S), s'il est petit, la bactérie a une sensibilité intermédiaire (I ou MS), alors que si l’espèce bactérienne examinée est ridicule ou absente, elle est résistante (R) au médicament. Pour déterminer exactement la sensibilité bactérienne, le diamètre des halos d’inhibition est mesuré en mm en comparant les valeurs obtenues aux valeurs standard pour la souche bactérienne.
Prévenir la résistance aux antibiotiques
Les antibiotiques ne sont PAS efficaces contre les virus. Les infections virales typiques sont le rhume, la grippe, la laryngite, la bronchite, le croup et la plupart des maux de gorge (pharyngite).
L'utilisation d'antibiotiques quand ils ne sont pas nécessaires (par exemple contre le rhume ou la grippe) peut entraîner le développement d'une résistance aux antibiotiques (les bactéries sont "résistantes aux antibiotiques" lorsqu'elles ne peuvent pas être tuées par l'antibiotique).
REMARQUE: c'est la bactérie qui résiste à l'antibiotique, PAS l'individu. Par conséquent, même si vous n'avez jamais utilisé d'antibiotiques, vous pouvez développer des infections causées par des bactéries résistantes aux antibiotiques.
Pour prévenir l’apparition d’une résistance aux antibiotiques, il est FONDAMENTAL de compléter le traitement prescrit par le médecin; même si cela fait du bien de ne pas suspendre les antibiotiques prématurément.
Lorsque les auréoles des disques proches se confondent au cours de l'antibiogramme, les antibiotiques en question sont considérés comme synergiques.
En alternative au procédé qui vient d’être décrit, l’antibiogramme peut également être réalisé en milieu liquide, en évaluant - après incubation - la turbidité correspondant à différents degrés de dilution du médicament (voir ci-dessous).
L’antibiogramme est devenu un test essentiel compte tenu de la diffusion généralisée du phénomène de pharmacorésistance. Choisir un mauvais antibiotique ou avoir recours à un médicament à large spectre pour éviter cette procédure peut en fait sélectionner les souches bactériennes résistantes à l'action de la même chose. Dans l'article consacré à ce sujet, nous avons vu comment cette capacité est initialement acquise par des mutations spontanées, puis transmise à d'autres bactéries. Ce n’est donc pas un hasard si la découverte et l’utilisation clinique de nombreux antibiotiques sont allées de pair avec l’émergence de bactéries résistantes à leur action. Très souvent, il s'agit d'une utilisation inappropriée et exagérée de ces médicaments, par exemple pour traiter des infections virales contre lesquelles ils sont totalement inutiles (la seule justification possible est de prévenir toute surinfection bactérienne chez les personnes à risque).
Les deux paramètres très importants dérivés de l'antibiogramme sont le MIC et le MBC:
- CMI (concentration minimale inhibitrice; concentration minimale inhibitrice): il s'agit de la concentration minimale du composé à tester nécessaire pour inhiber la croissance d'un microorganisme donné.
- MBC (concentration bactéricide minimale, concentration bactéricide minimale): il s'agit de la concentration minimale du composé à tester nécessaire pour causer la mort de plus de 99, 9% d'une population microbienne donnée.
Pour évaluer la MIC dans le sol solide pour l'antibiogramme, on suppose que l'agent microbien se diffuse du disque dans la gélose, créant ainsi un gradient de concentration; en conséquence, plus vous vous éloignez du disque et plus la concentration du médicament est faible, ce qui diminue progressivement jusqu'à atteindre la concentration critique (concentration minimale inhibitrice approximative). Au-delà de ce point, il y a une croissance confluente, alors que dans la zone la plus proche du disque, la croissance est absente.
Dans l'antibiogramme en milieu liquide, une série de tubes à essai contenant le milieu de culture et les dilutions à mettre à l'échelle (dans un rapport de 2) de l'antibiotique à tester est préparée. Dans chacun de ces tubes, une quantité standard des microbes à tester est ensemencée; il suit l'incubation et l'examen de la même chose. Comme prévu, en présence de turbidité, la croissance bactérienne est visible, tandis qu'une solution qui reste limpide indique une inhibition complète de la croissance microbienne, soulignant l'efficacité optimale du médicament. Dans ce cas, la CMI (concentration minimale inhibitrice) représente la dilution la plus élevée (c'est-à-dire la concentration la plus faible) d'antibiotique capable d'inhiber complètement la croissance du microorganisme. La MBC (concentration bactéricide minimale) est plutôt établie en faisant croître les échantillons prélevés dans le milieu liquide dans un milieu solide approprié et en évaluant toute prolifération bactérienne. La CMI correspondra donc à la concentration d'antibiotique présent dans le tube dans lequel le médicament est plus dilué et à ce que l'examen de culture ne montre aucun signe d'activité bactérienne (voir figure).
Les résultats de l'antibiogramme sont publiés dans un rapport spécial où sont indiqués les antibiotiques utilisés et les MMC correspondants; Parfois, les associations d'antibiotiques pouvant être utilisés et le degré de résistance des micro-organismes sont également énumérés.
Les méthodes traditionnelles d'exécution de l'antibiogramme, très utiles à des fins pédagogiques, évoluent constamment. Aujourd'hui, par exemple, des systèmes commerciaux automatisés sont disponibles, tandis que les disques en papier Bibula peuvent être remplacés par des bandelettes contenant des doses d'antibiotiques supplémentaires, dûment indiquées sur la bandelette elle-même (test E pour antibiogramme).
