généralité
L'électrophorèse est une technique d' analyse en laboratoire qui exploite la masse moléculaire et la charge électrique des protéines pour en évaluer la quantité et la qualité . En particulier, ce test permet de séparer les protéines en cinq fractions : albumine, alpha 1-globulines, alpha-2-globulines, bêta-globulines et gamma-globulines . La modification de la relation entre ces types de protéines est révélatrice de certaines conditions pathologiques. L'électrophorèse peut être effectuée sur des échantillons de sérum sanguin, d' urine ou d'autres liquides biologiques, tels que de la liqueur (liquide céphalo-rachidien).
Également appelé électrophorèse de protéines ou protidogrammes, ce test est réalisé en adoptant une méthode très spéciale: un champ électrique est appliqué à l'échantillon, grâce auquel les protéines sont "groupées" par type. Chacune des protéines permettant d'analyser l'électrophorèse possède en effet sa propre masse moléculaire et une charge électrique, ce qui leur permet de répondre de manière caractéristique aux contraintes fournies par le courant continu. Dans des conditions normales, par exemple, le premier pic attendu - plus haut et plus étroit - du chemin d'électrophorèse correspond à l' albumine .
En termes plus pratiques, l'électrophorèse est une analyse utilisée pour déterminer:
- La présence de protéines anormales;
- L'absence de protéines normales;
- Si un groupe de protéines est présent en quantité moindre ou supérieure à la normale.
L'électrophorèse peut être demandée par le médecin dans le cadre des tests de contrôle (analyse de routine) ou de la procédure de diagnostic, c'est-à-dire si d'autres analyses de laboratoire ont montré des modifications et qu'il est nécessaire d'approfondir ou de confirmer une suspicion clinique.
quoi
L'électrophorèse est une analyse de laboratoire qui fournit des informations importantes sur la quantité de protéines présentes dans le sérum sanguin ou d'autres échantillons biologiques et révèle, pour chaque fraction, s'il existe des anomalies de qualité. Cela est possible grâce à l'application d'un champ électrique exploitant la mobilité électrophorétique des protéines; la migration de ces macromolécules est influencée par leur masse, leur taille, leur charge et leur forme.
Le test permet notamment de séparer les protéines en cinq groupes : albumine, globulines alpha 1, alpha 2, bêta et gamma .
Le résultat de l'électrophorèse permet d'examiner la concentration de ces paramètres: la modification possible de la relation entre ces groupes de protéines est observée au cours de certains états pathologiques. Par conséquent, l'électrophorèse est utile pour confirmer un diagnostic et, une fois que la maladie est établie, pour suivre le patient pendant le suivi .
Electrophorèse: sur quels échantillons peut-on effectuer?
Les échantillons biologiques auxquels l'électrophorèse peut être appliquée sont principalement:
- Sérum : électrophorèse des séroprotéines ou électrophorèse des protéines sériques;
- Urine : électrophorèse urinaire ou électrophorèse de protéines urinaires;
- Liqueur (liquide céphalo-rachidien) : électrophorèse des protéines de la liqueur (remarque: la liqueur est le liquide qui imprègne et protège le cerveau, la moelle épinière, les nerfs crâniens et les racines de la colonne vertébrale).
Electrophorèse: ce qui est mesuré
Les protéines plasmatiques sont des indicateurs très importants: de possibles altérations de leurs concentrations peuvent signaler la présence de nombreuses maladies.
Avec l'électrophorèse, il est possible de séparer les protéines suivantes dans l'échantillon:
- L'albumine ;
- Alpha 1 globulines ;
- Les alpha 2 globulines ;
- Les bêta-globulines ;
- Le gamma globuline .
À l'heure actuelle, de nombreux laboratoires effectuent une séparation à 6 bandes, c'est-à-dire avec séparation des bêta-globulines en deux fractions:
- Bêta 1 globuline ;
- Bêta 2 globulines .
Saviez-vous que ...
En laboratoire, l'électrophorèse est l'une des techniques les plus utilisées pour analyser la composition qualitative et quantitative des protéines. Cette méthode de séparation est basée sur la vitesse de migration différente des particules chargées électriquement, à travers une solution et un support, sous l’influence d’un champ électrique .
L'albumine est la protéine la plus abondante dans le sérum, ainsi que l'une des plus importantes du corps. Ceci est synthétisé par le foie et est principalement contenu dans les fluides interstitiels et le plasma, où il représente à lui seul environ la moitié des protéines en circulation. L'albumine remplit plusieurs fonctions, notamment la gestion correcte de la pression osmotique et le transport de substances telles que la bilirubine.
Les globulines alpha 1 et 2 exercent principalement une fonction de transport des lipides, des lipides sanguins et des hormones. Les bêta-globulines transportent également des substances dans le sang; parmi les protéines les plus connues de ce groupe, on trouve la transferrine (appelée à transporter le fer) et la bêta-2 microglobuline. Les gamma globulines, par contre, ont principalement une fonction anticorps.
Certaines protéines plasmatiques sont produites par le foie (comme l'albumine), tandis que d'autres sont libérées dans le sang par des cellules appartenant au système immunitaire (gamma globulines).
Lire la suite: Protéines plasmatiques - Fonctions et caractéristiques »Electrophorèse: principe de base
Avant - propos : en général, l’ électrophorèse est une méthode de séparation basée sur la vitesse de migration différente des particules chargées électriquement, à travers une solution et un support poreux et inerte (tel que le papier, le gel d’agarose ou une feuille d’acétate de cellulose), sous l'impulsion d'un champ électrique. De nombreuses molécules d'intérêt biologique (acides aminés, peptides, protéines, ADN et ARN) ont des groupes ionisables dans leur structure. Par conséquent, à une valeur de pH appropriée, ils sont présents en solution sous forme d'espèce chargée électriquement. Sous l'influence d'un champ électrique, ces molécules chargées migrent vers la cathode ou l' anode, selon qu'elles possèdent une charge positive ( cation ) ou négative ( anion ).
L'électrophorèse est une méthode qui permet de séparer les macromolécules et, en particulier, les protéines en fonction de:
- Masse moléculaire ;
- Charge électrique .
Lorsqu'elles sont placées dans un environnement basique, les protéines se comportent comme des acides: le groupe COOH des différents acides aminés qui composent la structure de la macromolécule se dissocie en COO- (particule négative) et H + (ion positif). Les protéines sont donc chargées dans un ensemble négatif et leur mobilité électrophorétique va du pôle négatif (cathode) au pôle positif, c’est-à-dire vers l’anode (car les charges négatives dépassent les charges positives).
De retour à l'examen, l' échantillon de patient - contenant un mélange de protéines (par exemple, protéines sériques) - est placé sur une bande électrophorétique, c'est-à-dire le support de migration .
La séparation en cinq bandes est obtenue par l'application d'un champ électrique, généré par un courant continu, qui permet aux différentes fractions de protéines de migrer en fonction de leur masse et de leur charge électrique.
Le résultat - appelé TRACCIATO ÉLECTROPHORÉTIQUE - consiste en divers pics et courbes auxquels les fractions de protéines, divisées par type et quantité, sont présentes dans le liquide en question:
- Normalement, le premier sommet, plus haut et plus étroit, est celui d’ ALBUMINA ;
- Ensuite, les pics GLOBULINE sont observés, beaucoup plus bas que l'albumine.
L'augmentation ou la diminution de l'amplitude et de l'intensité des pics formés sur le trajet indique une présence plus ou moins importante des protéines de chaque catégorie.
Saviez-vous que ...
Dans le passé, la transthyrétine était appelée préalbumine en raison de la plus grande mobilité électrophorétique par rapport à l'albumine, ce qui lui permettait de migrer vers une position plus anodique.
Pour en savoir plus: Préalbumine - Qu'est-ce que c'est »Pourquoi oui
A quoi sert l'électrophorèse?
L'électrophorèse est utilisée pour diagnostiquer ou surveiller les maladies qui présentent, parmi leurs découvertes cliniques, une altération des concentrations de protéines dans le plasma, l'urine ou d'autres échantillons biologiques.
Cette anomalie peut être trouvée, par exemple, dans le cas de:
- Maladies du foie et des reins ;
- Les infections ou l'inflammation ;
- Myélome multiple ;
- Sclérose en plaques .
Électrophorèse: quand l'examen est-il prescrit?
INTRODUCTION : la détermination des protéines totales dans le sang - protéinémie - et albumine - albuminémie - est généralement incluse dans les tableaux de bord, elle est donc fréquemment utilisée dans l'évaluation de l'état de santé d' une personne . Dans les analyses de routine, la modification de ces paramètres peut être considérée comme une CLIENT D'ALARME et peut induire un approfondissement du tableau clinique, en particulier si le patient présente une symptomatologie particulière.
L' électrophorèse de PROTÉINES DANS LE SERUM peut être prescrite:
- Si d’autres tests de laboratoire donnent des résultats anormaux, en termes d’absence ou de quantités de protéines plasmatiques inférieures et supérieures à la normale;
- Lorsque suspecté la présence de:
- Inflammation en cours;
- infection;
- Maladie auto-immune;
- néphropathie;
- une maladie du foie;
- Maladies caractérisées par la production d'un composant monoclonal, à savoir des anticorps ayant exactement la même structure chimique, tels que:
- Myélome multiple et ses variantes;
- Macroglobulinémie de Waldenström;
- Amyloïdose.
Par contre, quand une concentration élevée de protéines est présente dans l'urine, le médecin peut demander l'exécution de l' électrophorèse des PROTEINES URINES . L'examen permet de déterminer la source de la modification, confirmant ou corroborant le diagnostic.
L' électrophorèse de PROTEINES OF LIQUOR peut être prescrite en cas de suspicion de diagnostic de sclérose en plaques . Dans ce cas, le motif électrophorétique déterminé est caractéristique car il met en évidence la présence des bandes dites oligoclonales, qui ne sont normalement pas présentes dans l'électrophorèse sérophorique.
Une fois la maladie diagnostiquée, une électrophorèse peut être effectuée à intervalles réguliers pour:
- Surveillez la maladie au fil du temps, puis suivez le cours (suivi);
- Vérifier l'efficacité du protocole thérapeutique .
Valeurs normales
Chez un adulte en bonne santé, la concentration normale de protéines sanguines totales est comprise entre 6, 4 et 8, 3 grammes par décilitre de plasma (g / dl).
Albumine (électrophorèse sieroprotéique)
L'albumine constitue 59 à 69% du total des protéines plasmatiques.
- Valeur de référence Albumine: 3, 6-4, 9 g / dl
Alpha 1 globulines
Les alpha-1 globulines constituent de 2, 0 à 3, 5% des protéines plasmatiques totales.
- Valeur de référence Alpha 1 globulines : 0, 2-0, 4 g / dl
Alpha 2 globulines
Les alpha-2 globulines représentent 6-11% du total des protéines plasmatiques.
- Valeur de référence Alpha 2 globulines : 0.4-0.8 g / dl
Bêta-globulines
Les bêta-globulines représentent 6 à 12% des protéines plasmatiques totales.
- Valeur de référence Bêta-globulines: 0, 6-1 g / dl
Gamme Globuline
Les gamma globulines représentent 9 à 20% du total des protéines plasmatiques.
- Valeur de référence Gamma globulines : 0, 9-1, 4 g / dl
Remarque : l'intervalle de référence de l'examen peut varier légèrement en fonction de l'âge, du sexe et de l'instrumentation utilisée dans le laboratoire d'analyse. Pour cette raison, il est préférable de consulter les plages indiquées directement dans le rapport. Il convient également de rappeler que les résultats des analyses doivent être évalués dans leur ensemble par le médecin généraliste, qui connaît la situation anamnestique du patient.
Hautes valeurs - Causes
Électrophorèse sérique: quelles sont les causes de l'augmentation des valeurs?
albumine
La comparaison avec l'électrophorèse d'une augmentation de la sérum albumine est fréquente au cours des états morbides qui éliminent l'eau du corps et entraînent l'apparition d'une déshydratation, notamment:
- Vomissements persistants et diarrhée;
- Brûlures prolongées;
- Transpiration excessive;
- La maladie d'Addison;
- Coma diabétique.
Sur le trajet électrophorétique, une concentration plus élevée en albumine peut indiquer:
- Sarcoïdose (maladie inflammatoire systémique);
- Maladie de Buerger ou thromboangioite oblitérante (pathologie touchant les vaisseaux sanguins et les artères).
ALPHA 1 GLOBULINE
Les alpha-1 globulines sont augmentées dans les cas suivants:
- Processus inflammatoire ou infection en cours;
- Infarctus cardiaque;
- Prendre la pilule contraceptive;
- Grossesse.
ALFA 2 GLOBULINE
Des valeurs élevées d'alpha 2 globulines peuvent signaler la présence de:
- Maladie rénale;
- Inflammation ou infection en cours;
- Infarctus cardiaque;
- le diabète;
- Le syndrome de Down;
- Quelques tumeurs malignes.
BETA GLOBULINE
L'augmentation des bêta-globulines dans le trajet électrophorétique est révélatrice de:
- Taux élevé de cholestérol dans le sang (hypercholestérolémie);
- Anémie ferriprive;
- Quelques cas de myélome multiple;
- Grossesse.
GAMME GLOBULINE
En électrophorèse, l'augmentation des plages de globuline polyclonale peut être associée à:
- Maladies inflammatoires chroniques;
- Certaines maladies du système immunitaire;
- La polyarthrite rhumatoïde;
- Lupus érythémateux disséminé;
- Maladies chroniques du foie (telles que l'hépatite et la cirrhose);
- Infections aiguës et chroniques.
Des valeurs gamma élevées de globuline monoclonale peuvent indiquer, au contraire, la présence de:
- Certaines tumeurs;
- Myélome multiple;
- lymphome;
- Macroglobulinémie de Waldenström.
Pour identifier quelle gamma globuline est présente dans la bande monoclonale dans un motif électrophorétique, il est possible de procéder à une immunofixation.
Électrophorèse d'urine
Une augmentation significative de l'électrophorèse des protéines dans l'urine peut indiquer un dysfonctionnement des glomérules et des tubules rénaux .
Électrophorèse de la liqueur
Si l’électrophorèse aboutit à une augmentation des protéines normalement absentes du liquide cefalorachidiano, il peut se produire une inflammation, une infection ou d’autres maladies du système nerveux .
La découverte de bandes oligoclonales dans le schéma électrophorétique est indicative de la sclérose en plaques .
Valeurs faibles - Causes
Électrophorèse sérique: quelles sont les causes de la réduction des protéines?
albumine
Une réduction de l'albumine dans le modèle électrophorétique peut être provoquée par toutes les conditions caractérisées par:
- Malnutrition (notamment: carences en protéines dues à une réduction de l'apport alimentaire);
- Malabsorption secondaire à: entéropathie, maladie coeliaque, maladie de Crohn, intolérance aux protéines;
- Catabolisme accru : inflammation grave, états fébriles, cachexie, néoplasmes, hyperthyroïdie, hypercortisolisme, etc.
Les pics d'albumine diminuent également à la suite de maladies affectant le foie (capacité de synthèse) et les reins (augmente l'élimination).
La concentration en albumine trouvée lors de l'électrophorèse sérique peut chuter, en particulier, lorsqu'elles sont établies:
- Cirrhose du foie (c'est la cause la plus fréquente);
- Hépatite aiguë et chronique;
- Anomalies génétiques (synthèse des albumines défectueuses);
- Maladie rénale (en particulier syndrome néphrotique et glomérulonéphrite).
La découverte d'une faible albumine avec électrophorèse est également observée pendant la grossesse pour:
- Modifications hormonales altérant la perméabilité vasculaire et la fonctionnalité de nombreux organes de la femme enceinte.
- Utilisation accrue de protéines par le fœtus.
ALPHA 1 GLOBULINE
Les alpha-1 globulines sont réduites à l'électrophorèse en présence de:
- Maladies hépatiques graves;
- Emphysème inné;
- Maladies du rein.
ALFA 2 GLOBULINE
Les faibles valeurs d'alpha 2 globulines peuvent indiquer:
- La malnutrition;
- Maladies hépatiques graves;
- Hémolyse.
BETA GLOBULINE
Une concentration réduite de bêta-globulines dans le trajet d'électrophorèse peut signaler:
- La malnutrition;
- Cirrhose du foie.
GAMME GLOBULINE
Les valeurs réduites des gamma globulines peuvent indiquer la présence de diverses maladies du système immunitaire.
Électrophorèse d'urine
Normalement, avec l'électrophorèse, on trouve une petite concentration de protéines dans l'urine. Par conséquent, ce résultat n'indique pas la présence de certaines maladies.
Électrophorèse de la liqueur
Dans des conditions normales, la concentration de protéines totales dans la liqueur est très faible. La comparaison des valeurs réduites à l'électrophorèse n'est donc pas corrélée à une signification pathologique particulière.
Comment effectuer
Electrophorèse: en quoi consiste l'examen
- Electrophorèse séroproote (prise de sang) : pour obtenir la trace électrophorétique sur le sérum, il est nécessaire de procéder à un simple prélèvement de sang dans la veine du bras. Ensuite, le lactosérum est obtenu en séparant la fraction contenant les cellules de la fraction liquide.
- Electrophorèse des protéines dans l'urine (analyse d'urine) : il est nécessaire de recueillir une petite quantité d'urine dans un récipient stérile spécial. Selon les indications du médecin et du laboratoire, l'échantillon peut être prélevé sans délai précis ( aléatoire ) ou dans les 24 heures .
- Électrophorèse de la liqueur (analyse du liquide céphalorachidien) : elle nécessite le retrait d’une petite quantité de liqueur, en insérant une aiguille, dans la cavité rachidienne ( ponction lombaire ).
préparation
Electrophorèse: une préparation est-elle nécessaire?
- Avant le prélèvement de sang, certains laboratoires peuvent nécessiter un jeûne d’au moins 10 à 12 heures. Pendant cette période, il est permis de prendre une petite quantité d’eau.
- L'électrophorèse peut être effectuée sur de l' urine collectée à une heure précise de la journée (au hasard) ou pendant 24 heures. Il est donc nécessaire d'obtenir les contenants stériles appropriés à l'avance.
- En ce qui concerne l'électrophorèse des boissons alcoolisées, aucune préparation spéciale n'est requise.
Qu'est-ce qui peut altérer le résultat de l'examen?
Certains médicaments peuvent influer sur l'issue de l'électrophorèse. Il est donc conseillé de signaler tout traitement en cours au médecin. Par exemple, les médicaments pouvant modifier les résultats cliniques incluent les contraceptifs oraux, les stéroïdes anabolisants, les androgènes, les hormones de croissance, l’insuline et les antibiotiques.
Parmi les autres facteurs pouvant influencer l'examen, citons:
- Hyperlipidémie (présence de nombreuses graisses dans le sang);
- Administration de grandes quantités de fluides intraveineux;
- Régime végétarien;
- Échantillons hémolysés (si l’électrophorèse est effectuée sur du sérum).
Interprétation des résultats
Le modèle d'électrophorèse est évalué en combinaison avec les résultats d'autres analyses et fournit des informations sur l'état de santé du patient.
La diminution ou l'augmentation des protéines dans l'électrophorèse dans le sérum, l'urine ou les boissons alcoolisées montre la présence de diverses maladies, identifiées en fonction du paramètre affecté par l'altération.
Nous devons toujours nous rappeler que les valeurs de référence peuvent changer d’un laboratoire à l’autre. Par conséquent, il est essentiel de consulter votre médecin de premier recours ou un spécialiste référant pour la lecture et l'interprétation des résultats.
